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細(xì)胞破碎方法有哪些?

文章出處:原創(chuàng) 作者:洛尚中國(Lawson) 人氣: 578 發(fā)表時間:2016/12/11 13:29:11

液體剪切壓力:

通過將樣品從高壓腔轉(zhuǎn)入到低壓腔時產(chǎn)生的快速壓力落差來破碎細(xì)胞

優(yōu)點(diǎn):破碎快速有效,適合大體積細(xì)胞破碎

缺點(diǎn):可導(dǎo)致樣品溫度升高(操作時需要冷卻系統(tǒng))

超聲

通過高頻率的超聲波破碎細(xì)胞粉碎

優(yōu)點(diǎn):操作簡單

缺點(diǎn):可導(dǎo)致樣品溫度升高,其很難通過冷卻系統(tǒng)降溫,剪切力有可能導(dǎo)致蛋白質(zhì)受損,噪音較大,破碎量較小

玻璃珠磨碎

用玻璃珠的攪動來磨碎細(xì)胞

優(yōu)點(diǎn):對于很難破碎的細(xì)胞(如酵母)非常有用

缺點(diǎn):有些慢且有噪音

滲透壓

從高滲透壓轉(zhuǎn)向低滲透壓介質(zhì)

優(yōu)點(diǎn):操作簡便,花費(fèi)低廉

缺點(diǎn):僅用于外壁較脆弱的細(xì)胞(如動物細(xì)胞)

反復(fù)凍融

通過反復(fù)形成冰晶破碎細(xì)胞;通常結(jié)合酶法裂解下細(xì)胞

優(yōu)點(diǎn):操作簡便,花費(fèi)低廉,產(chǎn)生大量細(xì)胞膜碎片

缺點(diǎn):慢,也許會損傷敏感蛋白質(zhì)或者破壞蛋白質(zhì)和細(xì)胞膜的相互作用,產(chǎn)量低

酶法裂解

常和其他技術(shù)一同使用,如反復(fù)凍融或滲透壓破碎法;溶菌酶是破碎細(xì)菌細(xì)胞壁最常用的酶

優(yōu)點(diǎn):溫和,可產(chǎn)生較大的細(xì)胞膜碎片

缺點(diǎn):慢,產(chǎn)量低


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